細胞:HSC3細胞
中文名稱:人舌鱗癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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胚胎干細胞信號途徑研究新發現
研究發現Wnt和TGF-β信號途徑是離體條件下使用胚胎干細胞來誘導形成原條(primitive streak,亦稱原線,是鳥類和哺乳類發育初期的胚盤上先于器官原基在明區內暫時出現的,沿中線走行的線條狀隆起)所必須的。
發育動物中,原條的形成和它衍生的胚層(中胚層和內胚層)是許多組織形成的先決條件。
K562細胞 白血病細胞種屬:人、LNCaP細胞 前列腺癌細胞種屬:人
為了在離體條件下模擬這些發育階段,研究使用了一種胚胎干細胞。除了表達來源于brachyuri基因座的GFP蛋白,這種細胞還表達來自foxa2基因座的CD4。,一種表達不同水平的CD4-Foxa2的GFP-Bry+細胞群體因這種胚胎干細胞系的分化而形成。
對基因表達模式和發育潛力的分析表明CD4-Foxa2hiGFP-Bry+細胞群表現出了早期原條的特征,而CD4-Foxa2loGFP-Bry+細胞則像晚期原條。
MOLT-4細胞 白血病細胞種屬:人、MRC-5細胞 成纖維細胞種屬:人
利用這種模型,研究證實Wnt和TGF-β/nodal/activin信號途徑都是產生CD4-Foxa2+gfp-Bry+細胞所必須的。Wnt或低水平的acitvin能誘導出一種后期的原條細胞群,而高水平的actinvin則誘導形成一種早期的原條細胞。
MEL細胞 白血病細胞種屬:小鼠、MCF 7B細胞 腺癌細胞種屬:人
最終,研究發現持續的activin信號能夠刺激CD4-Foxa2+GFP-Bry+胚胎干細胞群形成內胚層。這些發現表明,與胚胎中胚層誘導有關的發育事件能夠在胚胎干細胞模型中重現,并因此了解到與內胚層和中胚層形成有關的信號途徑。