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上海瑞齊實(shí)業(yè)科技有限公司
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更新時(shí)間:2018-02-19 15:11:36瀏覽次數(shù):465次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 智慧城市網(wǎng)Anti-SCXA抗體,堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子SCXA抗體現(xiàn)貨供應(yīng),產(chǎn)品類型:一抗,產(chǎn)品應(yīng)用:WB=1:100-500 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 ,研究領(lǐng)域:免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 干細(xì)胞 轉(zhuǎn)
Anti-SCXA抗體,堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子SCXA抗體*,瑞齊生物抗體應(yīng)用于WB、IHC、IF、ELISA等實(shí)驗(yàn)中,*,提供完善的售前、售中、售后服務(wù),咨詢或在線客服,我們將竭誠為您服務(wù)。在RICKY,我們堅(jiān)持對產(chǎn)品質(zhì)量作不斷的評(píng)估、創(chuàng)新和改善以確保您對我們產(chǎn)品的高度信任!
【產(chǎn)品名稱】:Anti-SCXA抗體,堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子SCXA抗體
【規(guī) 格】:0.1ml/0.2ml
【濃 度】:1mg/1ml
【抗體來源】:Mouse,Rabbit or Goat
【克隆類型】:polyclonal or monoclonal
【產(chǎn)品類型】:一抗
【性 狀】:Lyophilized or Liquid
【亞 型】:IgG
【純化方法】:affinity purified by Protein A
【儲(chǔ) 存 液】:0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
【產(chǎn)品應(yīng)用】:not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
【保存條件】:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
應(yīng)用于WB實(shí)驗(yàn)時(shí)的操作方法:蛋白提樣品制備
1、 將培養(yǎng)液吸入至15 ml離心管中,于2500 rpm離心5 min。
2、 棄上清,加入5 ml PBS并用槍輕輕吹打洗滌,然后2500 rpm離心5 min。棄上清后用PBS重復(fù)洗滌一次。
3、 用槍吸干上清后,加100 μl裂解液(含PMSF)冰上裂解30 min,裂解過程中要經(jīng)常彈一彈以使細(xì)胞充分裂解。
4、將裂解液4℃、12000 rpm離心5 min,取上清分裝于0.5 ml EP管中并置于-20℃保存。
5、BCA法測蛋白濃度
SDS-PAGE電泳
1、 玻璃板對齊后放入夾中卡緊,然后垂直卡在架子上準(zhǔn)備灌膠。
2、按前面方法配10%分離膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。灌膠時(shí),可用10 ml槍吸取5 ml膠沿玻璃放出,待膠面升到綠帶中間線高度時(shí)即可。然后膠上加一層水,液封后的膠凝的更快。(灌膠時(shí)開始可快一些,膠面快到所需高度時(shí)要放慢速度。操作時(shí)膠一定要沿玻璃板流下,這樣膠中才不會(huì)有氣泡。加水液封時(shí)要慢,否則膠會(huì)被沖變型。)
3、 當(dāng)水和膠之間有一條折射線時(shí),說明膠已凝了。再等3 min使膠充分凝固就可倒去膠上層水并用吸水紙將水吸干。
4、 按方法配4%的濃縮膠,加入TEMED后立即搖勻即可灌膠。將剩余空間灌滿濃縮膠后將梳子插入孔槽。灌膠時(shí)也要使膠沿玻璃板流下以免膠中有氣泡產(chǎn)生。插梳子時(shí)要使梳子保持水平。待到濃縮膠凝固后,兩手分別捏住梳子的兩邊豎直向上輕輕將其拔出。
5、 用水沖洗濃縮膠,將其放入電泳槽中。
6、 測完蛋白含量后,計(jì)算含20-50 μg蛋白(根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行選擇,沒有固定的量)的溶液體積即為上樣量。取出上樣樣品至200 μl的EP管中,加入5×SDS 上樣緩沖液至終濃度為1×。上樣前要將樣品于沸水中煮5-10 min使蛋白變性。
7、 加入足夠的電泳緩沖液后開始準(zhǔn)備上樣。(電泳液至少要漫過內(nèi)測的小玻璃板。)用微量進(jìn)樣器貼壁吸取樣品,將樣品吸出不要吸進(jìn)氣泡。將加樣器針頭插至加樣孔中緩慢加入樣品(包括一孔做可視的蛋白marker)。(加樣太快可使樣品沖出加樣孔,若有氣泡也可能使樣品溢出。加入下一個(gè)樣品時(shí),進(jìn)樣器需在外槽電泳緩沖液中洗滌數(shù)次,以免交叉污染)
8、電泳:濃縮膠時(shí)用80-100 V跑,到分離膠以后用150-200 V跑,總時(shí)間2 h左右,電泳至溴酚蘭剛跑出即可終止電泳,進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。
轉(zhuǎn)膜
1、 轉(zhuǎn)一張膜需準(zhǔn)備6張7.0~8.3 cm的濾紙和1張7.3~8.6 cm的NC膜。切濾紙和膜時(shí)一定要戴手套,因?yàn)槭稚系牡鞍讜?huì)污染膜。將切好的硝酸纖維素膜置于甲醇液中浸泡后使用。
2、在加有轉(zhuǎn)移液的搪瓷盤里放入轉(zhuǎn)膜用的夾子、兩塊海綿墊、一支玻棒、濾紙和浸過的膜。 將夾子打開使黑的一面保持水平。在上面墊一張海綿墊,用玻棒趕走氣泡。在墊子上墊三層濾紙。
3、將玻璃板輕輕撬開后剝膠,除去小玻璃板后,將濃縮膠輕輕刮去。小心剝下分離膠蓋于濾紙上,用手調(diào)整使其與濾紙對齊,輕輕用玻棒搟去氣泡。將膜蓋于膠上,要蓋滿整個(gè)膠(膜蓋下后不可再移動(dòng))并除氣泡。在膜上蓋3張濾紙并除去氣泡。zui后蓋另一個(gè)海綿墊,合起夾子。整個(gè)操作在轉(zhuǎn)移液中進(jìn)行,要不斷的搟去氣泡。膜兩邊的濾紙不能相互接觸,接觸后會(huì)發(fā)生短路。
4、將夾子放入轉(zhuǎn)移槽槽中,使夾的黑面對槽的黑面,夾的白面對槽的紅面。電轉(zhuǎn)移時(shí)會(huì)產(chǎn)熱,在槽的一邊放一塊冰來降溫。一般用60 V轉(zhuǎn)移2 h或40 V轉(zhuǎn)移3 h。
免疫反應(yīng)
1、將膜用TBS從下向上浸濕后,移至含有封閉液的平皿中,室溫下脫色搖床上搖動(dòng)封閉1 h。
2、將一抗用TBST稀釋至適當(dāng)濃度(在1.5 ml離心管中);將膜涂滿一抗溶液后置于濕盒中,4℃孵育過夜,用TBST在室溫下脫色搖床上洗兩次,每次10 min;再用TBS洗一次,10 min。
3、同上方法準(zhǔn)備二抗稀釋液并與膜接觸,室溫下孵育1~2 h后,用TBST在室溫下脫色搖床上洗兩次,每次10 min;再用TBS洗一次,10 min,進(jìn)行化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。
化學(xué)發(fā)光,顯影,定影
將A和B兩種試劑在保鮮膜上等體積混合;1 min后,將膜蛋白面朝下與此混合液充分接觸;1 min后,將膜移至另一保鮮膜上,去盡殘液,包好,放入X-光片夾中,曝光相應(yīng)時(shí)間。沖洗膠片。
相關(guān)產(chǎn)品:
CDC4/FBW7/SEL10??腫瘤抑制因子FBW7抗體
CADM 4??細(xì)胞粘附分子4抗體
DAB2IP??Dab2相互作用蛋白抗體
DAB2??信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體
ADRB3/beta 3 Adrenergic Receptor??β3腎上腺素能受體抗體
DACH1??細(xì)胞命運(yùn)決定因子DACH1抗體
DRG1??GTP發(fā)育調(diào)控結(jié)合蛋白1抗體
DNAJB4/HSP40 homolog??熱休克蛋白家族40抗體
DAL1/EPB41L3??細(xì)胞骨架4.1蛋白家族DAL1抗體
MIG6/ERRFI1??有絲分裂原誘導(dǎo)基因6抗體
EXTL??外生性骨疣樣蛋白2抗體
FBXO31??F-box蛋白家族FBXO31抗體
FLCN/BHD/Folliculin??卵巢濾泡激素抗體(BHD綜合征)
GADD45GIP1??GADD45γ相互作用蛋白1抗體
GAS8??生長停滯特異性蛋白8抗體
GTPBP4/CRFG??GTP結(jié)合蛋白4抗體(慢性腎功能衰竭蛋白)
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SMARCA6/HELLS??淋巴特異性解旋酶抗體
SMARCA1/SNF2L??解旋酶SNF2L抗體
ACBD6??酰基*結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
ACVR1B/ALK4??激活素A受體1B抗體
ACY1/Aminoacylase 1??氨基酰化酶1抗體
ACVRL1/ALK1??激活素受體樣激酶1抗體
ASAH2??酰基鞘氨醇脫酰酶2抗體
ASAM/ACAM??脂肪細(xì)胞特異性粘附分子抗體
CARPX/CA10??碳酸酐酶相關(guān)蛋白抗體(腦蛋白15)
CA12??碳酸酐酶12抗體
IGFR3/CD16??FC段γ受體3抗體(免疫球蛋白G Fc段受體III)
CD200/MOX1??膜糖蛋白CD200抗體
CD66c/CEACAM6??癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子抗體
CPA1/Carboxypeptidase A??胰羧肽酶A1抗體
CPA2/Carboxypeptidase A2??羧肽酶A2抗體
CPB1/Carboxypeptidase B1??胰羧肽酶B1抗體
CPEB1??細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1抗體
Cystatin E/M??半*蛋白酶抑制劑6抗體
CRABP2??細(xì)胞維甲酸結(jié)合蛋白2抗體
CST7/Cystatin F??半*蛋白酶抑制劑7抗體
NBL1/DAND1??神經(jīng)母細(xì)胞瘤抑瘤蛋白1抗體
DLL4/Delta 4??Notch信號(hào)通路Delta樣配體4抗體
DPP2??溶酶體*蛋白酶DPP2抗體
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Hemopexin/HPX??糖蛋白β-1B抗體
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本公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體,訂購優(yōu)質(zhì):。
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