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技術(shù)文章

細胞核蛋白微量制備試劑盒

閱讀:578發(fā)布時間:2014-12-26

蛋白質(zhì)系列
CAT#:RS990613-25
CAT#:RS990613-100
低溫運輸、4℃保存
細胞核蛋白微量制備試劑盒
Nuclear Protein Miniprep Kit
使用手冊V1.0
產(chǎn)品及特

DNA 只存在于細胞核內(nèi),因此參與轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和DNA 復(fù)制的蛋白質(zhì)主要存在于細
胞核中,要研究蛋白質(zhì)與DNA 的相互作用,首先需要制備能夠與DNA 作用的天然細
胞核蛋白質(zhì)。目前、細胞核蛋白質(zhì)制備方法一般都比較繁瑣,一次處理大量樣品時
尤其不便,為此本公司開發(fā)了本產(chǎn)品,用于從哺乳動物組織和培養(yǎng)細胞核蛋白的微
量提取,它具有下列特點:
1. 提取制備過程簡便,只需要一小時。
2. 實驗重復(fù)性好,尤其適合同時處理多個樣品。
3. 可用于培養(yǎng)的動物細胞,也可以用于組織細胞。
4. 制備的核蛋白能保持天然活性,可以直接用于轉(zhuǎn)錄因子活性分析、凝膠阻滯實
驗(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA 足跡圖實驗和甲
基化干擾實驗酶活性測定等研究。
規(guī)格及成

成份25 次包裝100 次包裝
溶液A 10 mL 40 mL
溶液B 2.5 mL 10 mL
使用手冊1 份1 份
運輸及保

低溫運輸、4℃保存,有效期一年。
自備試劑無
使用方法1、對培養(yǎng)細胞:將覆蓋率為55-65%的培養(yǎng)細胞用自備的*溶液(天澤產(chǎn)品編
號:90306)按標(biāo)準(zhǔn)的*法處理,然后刮到1.5mL 塑料離心管中,室溫離心
30 秒,小心棄上清。
2、對懸浮細胞:直接將5×105-7 個的懸浮細胞轉(zhuǎn)移到1.5mL 塑料離心管中,室溫
離心30 秒,小心棄上清。
3、用1.5 mL 自備的PBS 緩沖液洗滌細胞沉淀一次,然后室溫離心后棄上清。
4、在細胞沉淀中加入400 uL 溶液A,用手指彈管壁使沉淀懸浮起來。
5、冰浴10 分鐘,渦旋激烈震蕩10 秒混勻。
6、室溫離心10 秒種,小心棄上清。
7、在沉淀中加入100 μL 溶液B,輕輕混勻使沉淀懸浮起來。
8、冰浴20 分鐘。
9、4℃離心2 分鐘,小心收集上清液(細胞核提取物),可立即用于后續(xù)的凝膠滯
后實驗、BCA 法蛋白濃度測定或活性檢測等實驗,也可以分裝后放-70℃長期保
存。
說明:本方法可以從1×106 的細胞中得到50-70ug 的核蛋白質(zhì)。


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