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豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒實驗步驟

閱讀:564發布時間:2014-5-14

豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒    guinea pig Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit     ,規格:96T/48T,產品別名:    豚鼠白三烯B4(LTB4)檢測試劑盒 
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒原理的簡要說明書:LTB4 ( Leukotriene B4),LTB4是5 -脂氧酶(5 – lipox – ygenase )代謝途徑的產物之一,中性粒細胞是其主要來源。LTB4通過Gq偶聯,刺激中性粒細胞分泌。LTB4在炎癥、免疫系統疾病和變態反應中發揮著重要作用。LTB4是PPARα的配體,PPARα的激活可導致白三烯B4分解,限制炎癥反應。          
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒實驗步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

 


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