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技術文章

elisa酶聯免疫吸附實驗直接法和間接法優缺點

閱讀：8687發布時間：2015-9-22

    因為ELISA酶聯免疫吸附實驗具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優點。已成為分析化學領域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法。
elisa可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑：
（1）固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent)；
（2）酶標記的抗原或抗體,稱為"結合物"(conjugate)；
（3）酶反應的底物。根據試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設計出各種不類型的檢測方法。
elisa可根據抗原抗體的結合情況來分類為以下兩種方法。
直接法（direct elisa）
    將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標記的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。
優勢：操作手續簡短，因無須使用二抗可避免交互反應。
缺點：試驗中的一抗都得用酶標記，但不是每種抗體都適合做標記，費用相對提高。
間接法（indirect elisa）
    此測定方法與直接法類似，差別在于一級抗體沒有酶標記，改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
優勢：二抗可以加強信號，而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應性。
缺點：交互反應發生的機率較高。


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