細(xì)胞簡介：

豬心臟微血管內(nèi)皮分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個(gè)器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明，心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機(jī)制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長因子研究中起著重要作用。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的豬心臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的豬心臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

豬心臟微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白三烯C4(LTC4)試劑盒 ，英文名： LTC4 ELISA Kit

Mouse beta hexosaminidase A (beta -hexosaminidase A) ELISA Kit 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)試劑盒

ELISA 小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1) 分裝

CLIAKitforIRAK(Humanierleukieceptorassociatedkinase)ELISAKit人白介素受體相關(guān)激酶

通用型非變性裂解液適合各種細(xì)胞native蛋白

ELISAKitACS大鼠脂酰合成酶

兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISAKIT   ELISA

兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISAKit   ELISA

兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISAKit   ELISA

兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISAKit   ELISA

磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體

18號染色體開放閱讀框1抗體

THSD1重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 Protein

bovine Insulin protein 牛胰島素蛋白 10mgbovine Insulin protein 牛胰島素蛋白

BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白

MBL1 Protein Rat 重組大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽

GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白

MEP1A重組小鼠 MEP1A 蛋白 Protein

TGFB1 Protein Rat 重組大鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白

UBE2D4重組人 UBE2D4 蛋白 Protein

豬心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠白介素1(IL-1)ELISA pcr檢測試劑盒

Human advanced glycation end product receptor (RAGE/AGER) ELISA Kit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)試劑盒

HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OTELISAKit 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)pcr檢測試劑盒分裝

HumanCaspase-9,Casp-9試劑盒人胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN28品系試劑盒20次

humansimilaoRIKENcDNA3110050K21geneELISAKit人類似RIKENcDNA3110050K21基因試劑盒規(guī)格：96T/48T