CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection
氧化應激檢測用探針(深紅色)
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見我司(懋康生物)整理的活性氧ROS熒光探針專題。
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Reactive oxygen species (ROS) 活性氧;DCFH-DA;HPF羥苯基熒光素;Mitosox 線粒體超氧化物探針;Dihydroethidium (DHE) 二氫乙錠;ROSGreenTM H2O2Probe;Life (Molecular Probe);
訂購信息:
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格(元) |
CellROX Deep Red Reagent, for oxidative stress detection 氧化應激檢測用探針(深紅色) | MX4816-50UL | 50µl | 2188 |
MX4816-100UL | 2×50µl | 4338 |
產品描述:
CellROX Deep Red Reagent是一種檢測活細胞氧化應激的新型熒光探針。此細胞膜滲透性的染料在還原態時無熒光或呈微弱熒光,一旦被活性氧物質(ROS)氧化后發明亮穩定的熒光,最大吸收/發射波長約~ 644/ 665nm(見圖I.CellROX Deep Red氧化后的熒光光譜圖)。其熒光信號主要定位在細胞質。CellROX Deep Red Reagent的深紅色熒光信號與其他活細胞染料和GFP兼容,使其適用于多重熒光試驗來測定各種細胞現象,包括與細胞毒性和細胞死亡的參數。不同于其它的ROS探針,比如H2DCFDA(MX4802-50MG),CellROX Deep Red Reagent的熒光信號經醛類固定后也能保留,使其相對于傳統的ROS探針來說在應用和操作流程更加靈活。CellROX Deep Red Reagent與各種檢測平臺兼容,比如傳統熒光顯微鏡、高內涵篩選儀器(HCS)、流式細胞儀、熒光酶標儀或高通量篩選(HTS)。還與各種臺式儀器兼容,比如Attune™儀器。
圖1. CellROX Deep Red Reagent氧化后的熒光光譜圖
本品以穩定、即用型的DMSO溶液形式提供,濃度為2.5mM,操作簡單,與熒光顯微鏡的標準工作流程兼容。每管染料(50µl)足夠做1個96孔板或20張爬片。適用于任何細胞類型的氧化應激檢測。
保存與運輸方法
保存:≤-20oC避光保存,保持干燥,1年有效。
運輸:冰袋運輸。
注意事項
本品對光和空氣敏感,使用過程中切記不可長時間敞開瓶蓋。當瓶子開口后建議丟掉未用完的材料。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
需要自行準備的材料
細胞和培養基
生理鹽緩沖液(PBS,pH 7.2-7.6)
【可選】固定劑(比如,溶于PBS的3.7%甲醛)
實驗步驟
以下步驟專門為BPAE,HepG2, U-2 OS和RAW巨噬細胞所開發,優化后的染色工作濃度為5µM,但是此實驗適用于任何細胞類型。生長培養基、細胞密度、細胞類型變化和其他因素可能會影響標記效率。在初始實驗,建議設置濃度梯度,以確定最佳的實驗條件和適合研究細胞類型的工作濃度。
CellROX Deep RedReagent對光和空氣敏感,使用過程中切記不可長時間敞開瓶蓋。當瓶子開口后建議丟掉未用完的材料。
用待測化合物或藥物處理細胞,孵育一定時間。【注】:待測化合物或藥物處理后沒有必要去除培養基。
加CellROX Deep RedReagent到細胞內使其終濃度為5µM,37℃孵育30min。
去除培養基,用PBS清洗3次。
【可選】可用3.7%甲醛固定細胞15min。需在CellROX Deep RedReagent染色2h內進行熒光信號檢測。
【可選】此時可用NucBlue活細胞染料(一種細胞核復染劑)或其他復染劑如Hoechst 33342(CAT#:MX4204-10ML)對細胞染色。
應用示例
圖II. CellROX Deep RedReagent測定牛肺動脈內皮細胞(BPAE)的氧化應激水平。在96孔板內接種BPAE細胞。之后用含維生suK3(100µM)或不含維生suK3的培養基37℃處理1h【在孵育的后30min時向某些對照和維生suK3處理孔內加入超氧化物清除劑MnTBAP(100µM)】。之后細胞用CellROX Deep RedReagent(5µM)和Hoechst 33342染色,將探針加入完quan培養基內37℃孵育30min。細胞經PBS清洗后,之后成像檢測。
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——Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。
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